甘蔗是最重要的糖料作物。甘蔗條紋花葉病毒(SCSMV)引發(fā)的甘蔗花葉病可導致產(chǎn)量和蔗糖含量大幅下降。在病害防控過程中，目標病原體檢測技術是不可或缺的。然而，傳統(tǒng)的檢測方法耗時且需要昂貴的設備，對及時防控病害和抗病育種均不利。該研究建立了一種新型的檢測技術體系，采用葉片粗提物為反應模板，極大簡化和加快了樣品的制備過程，通過將重組酶聚合酶擴增(RPA)與CRISPR-Cas12a相結合，提高了檢測的靈敏度并且結果能夠可視化(圖 1)。

　　該技術從樣品制備到結果解讀整個實驗流程，只需50分鐘，反應設備只需一個水浴鍋，并且結果可以用藍光光譜儀或紫外手電筒進行目視判定。更重要的是，該技術具有高靈敏度，最低檢測極限為50拷貝，超過了RT-PCR的靈敏度，與RT-qPCR相當（圖2）。同時，該方法展現(xiàn)出卓越的特異性，與其他常見的甘蔗病毒，如甘蔗花葉病毒、甘蔗黃葉病毒和高粱花葉病毒，均無交叉反應（圖3）。通過檢測40個田間樣品葉片粗提物，驗證了該技術的實用性與穩(wěn)定性，其檢測結果與采用葉片RNA為模板的RTkaiyun中國網(wǎng)頁版登錄-PCR和RT-qPCR檢測結果100%一致，表明該對實驗室和田間現(xiàn)場檢測均適用（圖4）。

　　福建農(nóng)林大學國家甘蔗工程技術研究中心在讀碩士研究生高帥為該論文的第一作者，福建農(nóng)林大學國家甘蔗工程技術研究中心/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部甘蔗生物學與遺傳育種重點實驗室/農(nóng)學院許莉萍研究員和福建農(nóng)林大學國家甘蔗工程技術研究中心在讀博士研究生王婷為該論文的共同通訊作者，國家甘蔗工程技術研究中kaiyun中國網(wǎng)頁版登錄心郭晉隆副研究員參與了研究工作。研究得到了國家重點研發(fā)計劃和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系建設項目的聯(lián)合資助。